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货号

品名

规格

储存条件

保质期

TCL098-50ML

CryoXL™广谱冻存培养基

（含DMSO，不含抗生素、不含抗真菌剂和酚红，无菌过滤）

50ml/瓶

收到后-20°C保存（冰箱需无自动除霜）。解冻后2 -8°C可存放5天。避免反复冻融，解冻后可进行分装

12个月

HiMedia的细胞冻存液（又称冷冻培养基）为完全即用型，用于细胞冻存。它们使用方便，节约成本，可广泛用于各种哺乳动物细胞。TCL098是CryoXLTM化学成分确定的无动物源成分、无血清细胞冷冻培养基，用于无血清和无动物成分条件下生长的细胞的冷冻。该冷冻培养基确保冻存复苏后的细胞高活力，也可用于冻存干细胞和原代细胞。

该冷冻培养基是专有配方（成分不对外公布）。

使用说明：

可使用标准冻存流程，也可按下列流程操作。

冻存液解冻、混匀，并置于湿冰上。

冻存步骤：

1.为获最佳结果，细胞应处于对数期生长。

2.对于贴壁细胞：使用胰蛋白酶或其他非酶解离试剂温和解离细胞。在无血清条件下生长的细胞，可能需要的胰蛋白酶＜0.25％，以及更少的胰蛋白酶抑制剂。

3.对于悬浮细胞：直接将细胞悬液分装于无菌离心管。 通过离心轻轻地沉淀细胞（悬浮细胞为200~400×g，持续5分钟；贴壁细胞为200×g 5分钟）。 使用移液器，尽可能去除细胞上清而不影响细胞。

4.按细胞类型对应的推荐细胞密度，将细胞重悬于冻存液中。

5.将细胞分装到在适合的冻存管。将含细胞的冻结管放置于可控速率的冷冻装置中，温度约为每分钟降低1ºC。或者，将含有细胞的冷冻管置于含异丙醇的冻存盒中，并在-80℃保存过夜。或者，将它们储存在-20ºC 1-2h，然后-80ºC过夜。

6.将细胞放置液氮罐中长期储存。

解冻步骤：

1.取出含细胞的冻存管，然后37ºC水浴，快速解冻。

2.用10ml完全培养基稀释1ml细胞悬液，。

3.轻轻混合细胞，轻轻离心使细胞沉淀。

4.弃去上清，用完全培养基轻轻重悬细胞，并接种到相应培养容器中。

5.建议在解冻24小时内评估细胞活力。为准确评估，建议使用荧光分析法如EZBlue™（CCK004-EZBlue™细胞分析试剂盒）或代谢分析法如MTT（CCK003-EZcount™ MTT细胞分析试剂盒）。

注意：

1. 用于冻存的细胞应具有最佳的活力，以确保冻存过程中和复苏后细胞的最大存活率。

2. 冻存细胞取出时，必须极其谨慎，以防止管内氮气突然膨胀导致爆炸。

3. 要保证细胞冻存时的最大活力，细胞应匀速缓慢冷却，-1~-5℃/分钟。也可放入完全绝缘的冻存盒中，-80ºC保存24小时，再转入最终的存储位置。

4. 细胞复苏时，有必要慢慢稀释细胞冻存液，防止出现渗透压休克。有必要离心时，应用最小转速以防止剪切力损伤，如70-100g。

5.为实现复苏后细胞的快速增长，建议新接种的细胞密度高于常规传代培养的细胞密度，例如对于贴壁细胞，密度可为3~4×104个活细胞/ cm2。

6. 对主细胞库应进行的基本检测包括：细胞总数计数、活细胞计数、增长潜力、细菌真菌和支原体的筛查、细胞系的真实性。

质量控制：

外观

无色、透明溶液

pH值

7.60 -8.20

渗透压

1800.00 -2200.00（mOsm / Kg）

无菌检查

根据USP规定，培养14天后未观察到细菌或真菌生长

性能检查

冻存细胞并进行复苏后的细胞活力评估，和标准冻存液比较。